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孢子絲菌病體外快速診斷試劑條的研發(fā)
成果領(lǐng)域: 精準(zhǔn)醫(yī)療
推廣方式:
成果介紹
本項(xiàng)目根據(jù)球形孢子絲菌的細(xì)胞壁特點(diǎn),聯(lián)合機(jī)械法、化學(xué)法、酶解法,設(shè)計(jì)并開發(fā)了適用于球形孢子絲菌胞壁蛋白的粗提方法,該方法可以獲得多種胞壁蛋白,回收率高,并可對特異性抗原成分進(jìn)行進(jìn)一步純化(該部分內(nèi)容已經(jīng)申請一項(xiàng)國家發(fā)明專利)。對粗提的孢子絲菌病患者血清進(jìn)行了免疫印跡篩選并結(jié)合LC/MS方法對蛋白條帶的序列進(jìn)行檢測,鑒定出球形孢子絲菌HSP70_1-8和HSP70_5蛋白。利用大腸桿菌原核表達(dá)體系構(gòu)建了HSP70_1-8和HSP70_5表達(dá)體系,獲得了相應(yīng)質(zhì)粒表達(dá)的重組蛋白并通過重組蛋白免疫新西蘭兔后,獲得了高純度的多克隆抗體(該部分內(nèi)容已經(jīng)申請三項(xiàng)國家發(fā)明專利)。利用膠體金免疫層析方法,制備出了靶點(diǎn)為三種重組蛋白的孢子絲菌病檢測試劑條。
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